2020年4月8日/医麦客新闻 eMedClub News/--美国约翰斯·霍普金斯大学6日发布的全球新冠疫情最新统计数据显示，全球累计死亡病例已超过7万例，累计确诊病例已超过128万例。数据显示，截至美国东部时间6日7时01分（北京时间6日19时01分），全球累计确诊病例达1286409例，其中累计死亡70356例，累计治愈270098例。新冠疫情呈现全球大流行，在尚没有特效药的今日，我们迫切的需要疫苗和药物协助我们抗击疫情。
巨头下场——国内外公司加入新冠药物研发
面对新冠疫情，疫苗和抗体药物是两种应对策略。抗体药物以治疗为主，疫苗以预防为主，二者缺一不可，二者结合才能发挥更好的作用。
疫苗进程稍快，Moderna公司针对新冠感染的mRNA疫苗和我国康希诺生物与军事科学院联合开发的重组腺病毒载体疫苗都在推进临床试验，众多公司都在开展不同类型的疫苗开发。
部分针对新冠病毒的疫苗开发项目
而抗体药物进程较缓，最快也要今年夏季走上临床。
3月31日，清华大学、深圳市第三人民医院与腾盛博药（Brii Biosciences）合作，力争6个月开展临床试验。再生元（Regeneron）希望今年夏季开展人体临床试验。
部分针对新冠病毒的抗体开发项目
图片来源：biocentury
新冠病毒株极难获得——早期研发试验如何推进？
各地新冠实验如火如荼的开展，现在感染人数众多，临床试验推进不受影响。但是基于新冠病毒的危险性、极易传染的特性，新冠病毒株极难获得，企业早期研发不容易推进。
1.实验室环境要求高
培养新冠病毒对于实验室要求极高。新冠病毒具有极强的传染力，必须要在具有防护设备的实验室进行早期研发工作，至少是配备负压系统的P3级别实验室（生物安全防护三级实验室，简称P3实验室，P代表Physical containment。整个实验室完全密封，室内处于负压状态，从而使实验室内部的气体不会泄漏到外面而造成污染）才能起到一定的防护作用。
P3生物安全实验室
2.病毒株极难获得
除却对实验室有要求外，实验室人员资质、工作流程、污染物的处理都要通过严格的审核，同时对于每一种高致病性病毒分离培养活动，都要专门向国家卫生健康委员会提出申请，经过审核批准后才能开展特定的分离和培养活动。而且实验活动结束后，按照国家规定，要对实验材料进行封闭、上交等，以防泄露。所以，很多实验室并不具备资格，目前，我国有资格进行病毒株分离的是各省的疾控中心。
同时，国内的研究机构自主分离的病毒株是否被国际认可还存在不确定性，研发投入过大，用也许不被认可的病毒株进行试验风险过高，这时，企业如何应对才能确保针对新冠病毒的早期研发试验顺利推进？
注：根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为四级，一级最低，四级最高。生物安全防护一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物；二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四级适用于对人体具有高度的危险性，通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素。
新冠假病毒——安全可靠具有免疫原性
病毒株拿不到，但早期研发还要继续推进，对于研发的疫苗或者药物要进行安全性和有效性的测试，看是否对新冠病毒具有免疫作用。这时，假病毒应运而生，依据已经公开的病毒株的序列，制备一种具有原病毒的基本特点和免疫原性，同时又不具备致病性，方便实验室大规模使用的替代物。
Ostrich Pharma USA的首席执行官、京都府立大学生命与环境科学研究生院院长Yasuhiro Tsukamoto博士专注于研究鸵鸟抗体20多年。最近，他发现鸵鸟抗体对新冠病毒有抑制作用。他在研究中将基因工程改造的新冠病毒假病毒注射给鸵鸟，在鸵鸟蛋中成功获得了强活性的新冠病毒中和抗体。可见在没有真病毒的情况下，使用假病毒来进行研究也是个不错的选择。
鸵鸟抗体滴鼻剂
明尼苏达大学的研究者在研究冠状病毒抗体依赖增强（ADE）的分子机制时用到的就是假病毒，这篇发表于Journal of Virology的题为Molecular Mechanism for Antibody-Dependent Enhancement of Coronavirus Entry的文章，用MERS-CoV假病毒进行实验，揭示了中和单克隆抗体ADE增强的分子机制。同时提示我们，在研究SARS-COV-2 ADE效应副作用的的时候，也可以用假病毒进行替代。
Antibody-induced conformational changes of coronavirus spike
近日，中国医学科学院/北京协和医学院病原生物学研究所的研究人员在研究SARS-CoV-2入侵人体细胞的具体分子机制时，就是用假病毒构建SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统和293T的hACE2稳转细胞系，确定了SARS-CoV-2的易感细胞系、病毒受体、侵入途径和蛋白酶激活途径。研究人员利用SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统，筛选了一组人和猴细胞系，证实人血管紧张素转换酶2(hACE2)是SARS-CoV-2的受体，并在293T/hACE2细胞系中发现SARS-CoV-2主要通过内吞作用进入细胞。
研究成果发表于国际顶级学术期刊Nature的子刊Nature Communication，题为《Characterization of spike glycoprotein of SARS-CoV-2 on virus entryand its immune cross-reactivity with SARS-CoV》。
假病毒既然这么好用，我们就来看一家专业病毒制备的公司，派真生物是专业AAV生产和载体研发的公司，在假病毒的制备方面非常有经验。疫情发生后，派真生物走在抗击新冠疫情的第一线，第一时间研制了一款假病毒来支持新冠药物开发。
SARS-COV-2假病毒（Pseudovirus）模型是派真生物基于公布的新冠病毒SARS-COV-2的基因序列，利用三质粒包装系统研发出的产品，可用于新冠疫苗免疫原性的检测，以及测定动物模型血清的中和抗体的效价，可以高效地加快SARS-COV-2诊断抗体和治疗抗体研发和筛选。
SARS-COV-2突刺（Spike）糖蛋白通过结合宿主细胞表面ACE2受体感染宿主，基于bioRxiv上发布的人源ACE2蛋白与新型冠状病毒S蛋白结合的亲和力比与SARS病毒S蛋白结合的亲和力高10到20倍的结果，研究人员就以受体结合区为靶标制备抗体，阻断受体结合区与ACE2的相互作用。
派真生物采用pSpike、psPAX、lenti-Luc/lenti-EGFP三质粒包装系统在293T细胞中包装出新冠病毒S蛋白作为表面衣壳糖蛋白的假病毒模型；结合过表达密码子优化的人源ACE2的HEK293细胞稳转株这个系统。
同时该假病毒模型不具备致病性，安全可靠，能够通过哺乳动物表达系统稳定大规模生产，为研究人员提供了一种在P2实验室就可以进行的药物效果评价的模型，以确保研发工作的顺利推进。
产品明细：
产品特点：
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该假病毒产品有同时检测P24物理滴度和感染滴度（不担心滴度虚高的问题）；
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该假病毒没有致病性，只需要P2级实验室即可，适用于药物研发细胞水平的评估模型；
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同时提供密码子优化的人源ACE2过表达的HEK293细胞稳转株；
联系我们：
1）新冠假病毒中和检测服务咨询：
info@packgene.cn
2）假病毒产品订购：
020-28069346
15360083192
派真生物——专业AAV包装、生产专家
派真生物是一家专业的病毒载体CDMO公司，成立至今一直专注于AAV、慢病毒生产和载体研发，在假病毒的设计和包装方面有独到的经验。
公司联合创始人之一李华鹏博士，在麻省大学医学院基因治疗中心（全球范围内拥有最多AAV发明专利的机构）从事AAV载体基因治疗研究多年，联合创始人团队在基因治疗病毒载体设计、临床前上下游工艺、生物药、基因治疗药物临床运营管理及生产方面拥有10-30年丰富经验，曾主导多款基因治疗药物临床前开发、生产及临床试验。
派真生物现已有GLP级别AAV生产平台、GMP-like中试车间（满足IND申报AAV生产要求），同时基因治疗载体GMP厂房正在建设中，预计2020年底投入使用。
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2019年7月完成由凯泰资本投资的Pre-A轮融资。
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2019年11月顺利通过了国家高新技术企业认定。
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已为9个国家或地区包括百健、阿斯利康、绿叶医药、博雅辑因等超过100个生物医药公司及科研机构的长期客户提供AAV包装服务，获得了广泛的称赞及认可。
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2020年2月，完成由腾业创投投资的A轮融资
参考资料：
http://www.packgene.cn/index.php
医检界：【干货】实验室等级划分
派真生物：派真生物完成千万级A轮融资——推动基因治疗产业化
派真生物：COVID-19假病毒（Pseudovirus）模型 助力新冠病毒疫苗研发/血清中和抗体检测
